馬与人黃色毛片一部

  • <ol id="gzkjo"></ol>

  • <optgroup id="gzkjo"><em id="gzkjo"><pre id="gzkjo"></pre></em></optgroup>

    <strong id="gzkjo"></strong>
    <span id="gzkjo"><sup id="gzkjo"></sup></span>
    <span id="gzkjo"><blockquote id="gzkjo"></blockquote></span>
  • English | 登錄 | 注冊

    浙江納德儀器聯系電話
    行業新聞

    當前位置:首頁 > 行業新聞 > eppendorf艾本德移液器各型號移液實戰大比拼

    行業新聞

    納德始終堅持“以人為本、質量為先”的企業宗旨,秉承“嚴謹、文明、熱情、高效”的企業作風

    eppendorf艾本德移液器各型號移液實戰大比拼

    發布時間:2020-10-09

          光說不練假把式,今天小編的實驗室里就以常用的細胞活性實驗為例,對 12 道手動移液器、 12 道電動移液器和 epMotion 96 半自動移液工作站在細胞實驗中的移液效果進行比較,讓我們一起看看eppendorf艾本德移液器各型號的移液實力!

     

        從左到右依次是本次的參賽選手 epMotion 96 半自動移液工作站、Reference 2 手動移液器和 Xplorer 電動移液器。

     

    實驗原理

    細胞活性實驗用于測量某種藥物或某種處理對細胞活性的影響。其步驟包括細胞接種、加藥處理以及試劑檢測結果三部分。在此次實驗中,我們選用星孢菌素 (staurosporine,STS) 來對 HepG2 細胞進行處理。星孢菌素可以阻止 ATP 與激酶的結合,影響細胞的激酶系統,從而造成細胞毒性。

     

    專長"棒打鴛鴦"的星孢菌素結構式

     

    而檢測細胞活力則使用 CellTiter-Blue 試劑盒,其原理是在細胞中加入刃天青(Resazurin)?;罴毎梢詫⑷刑烨啻x為試鹵靈(Resorufin),利用 535 nm 波長的光激活并測量試鹵靈發出的 595 nm 熒光強度,檢測細胞中試鹵靈的含量,就可以得知經藥物處理過后的細胞活性狀態。

     

    活細胞可將刃天青代謝為試鹵靈

     

    實驗過程

    我們用 epMotion 96、電動多道移液器和手動多道移液器三種移液設備分別接種 3 96 孔板,每孔接種 10000 HepG2 細胞,培養 24 小時后加入 1 nM 20 μM 不等的星孢菌素并培養細胞 48 小時后按照 CellTiter-Blue 試劑盒配方加入試劑,300 rpm 混勻 1 分鐘后在培養箱中培養 2 小時。

     

    實驗結果

    我們來看看三組實驗結果的信號質量。我們從信噪比(S/B, signal-to-background ratio)和 Z 因子兩個角度來進行比較。

     

    信噪比是將測得信號值與背景熒光值進行比較,信噪比越高說明測得信號相較于背景越“脫穎而出”,實驗方式更加完美。

     

    Z 因子利用陽性對照組 ( p ) 和陰性對照組 ( n ) 的平均值和標準差來評價實驗方法的魯棒性(Robustness),即分析方法和數據的穩定性。Z 因子越接近 1 說明實驗方法越穩定和有效,當 Z 因子超過 0.5 時可以認為實驗方法很有效。

     

    Z 因子的計算方法

     

    從下表的實驗結果中我們可以看到,使用 epMotion 96 所得到的細胞數據信噪比最高,而手動多道移液器的信噪比最低。

     

    Z 因子的結果也是同樣,epMotion 96 和手動多道移液器的表現不分伯仲,但使用手動多道移液器的實驗組則不盡如人意,甚至有一塊孔板出現 Z 因子<0.5 的情況。

     

     三種移液設備分別測試所得的信噪比和 Z 因子數值

     

    接下來,讓我們對比一下三組實驗的可重復性。

     

    在同一塊細胞培養板中,每個孔之間的變異系數值(CV)體現孔間差異大小。計算 CV 值發現,無論是孔間 CV 值還是板間 CV 值,使用 epMotion 96 半自動移液工作站加液時的 CV 值更低,可重復性依然穩居第一寶座。

     

    epMotion 96 得到數據的板內和板間的變異系數都表現良好

     

    epMotion 96 在信號強度、信號的穩定性以及實驗結果可重復性上都表現良好,綜合起來,使用epMotion 96 可以擬合得到最好的曲線。epMotion 96 得到的數據每濃度梯度的標準差都更小,而手動多道移液器則有更大的標準差,部分濃度的數據也偏離了擬合曲線。

    eppendorf艾本德移液器

    展開
    • QQ咨詢

    • 在線咨詢
    • 點擊這里給我發消息
    • 點擊這里給我發消息
    • 點擊這里給我發消息
    馬与人黃色毛片一部
  • <ol id="gzkjo"></ol>

  • <optgroup id="gzkjo"><em id="gzkjo"><pre id="gzkjo"></pre></em></optgroup>

    <strong id="gzkjo"></strong>
    <span id="gzkjo"><sup id="gzkjo"></sup></span>
    <span id="gzkjo"><blockquote id="gzkjo"></blockquote></span>